【cck8实验原理】CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂盒，其核心原理基于WST-8（2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium) 的还原反应。该方法具有操作简便、灵敏度高、重复性好等优点，常用于药物筛选、细胞活性评估及生物毒性研究等领域。
一、实验原理总结
CCK-8实验的基本原理是通过检测细胞线粒体脱氢酶的活性来反映细胞的代谢活性。当CCK-8试剂被加入到培养体系中后，活细胞内的脱氢酶可以将WST-8还原为水溶性的黄色甲臜（formazan），而死细胞或受损细胞则无法进行此反应。通过分光光度计在450 nm波长下测定吸光度值（OD值），即可定量分析细胞的存活率和增殖情况。
该方法不仅适用于贴壁细胞，也适用于悬浮细胞，且对细胞无明显毒性，因此被广泛应用于细胞生物学研究中。
二、CCK-8实验原理表格
| 项目 | 内容 |
| 实验名称 | CCK-8实验 |
| 原理基础 | WST-8在细胞线粒体脱氢酶作用下被还原为甲臜 |
| 检测目标 | 细胞活性、增殖能力、药物毒性 |
| 检测方法 | 分光光度计测定450 nm处吸光度值（OD值） |
| 试剂组成 | 含WST-8的溶液，与细胞培养基混合使用 |
| 适用细胞类型 | 贴壁细胞、悬浮细胞 |
| 优势特点 | 快速、灵敏、无毒、可重复性强 |
| 应用领域 | 药物筛选、细胞毒性测试、细胞增殖研究 |
三、注意事项
1. 实验过程中应避免光照，以防止WST-8分解。
2. 不同细胞类型可能需要调整CCK-8试剂的使用浓度。
3. 实验前需进行预实验，确定最佳的细胞接种密度和时间点。
4. 测定OD值时应确保所有孔板同步处理，以减少误差。
通过以上原理和操作要点，CCK-8实验能够有效评估细胞状态，为后续研究提供可靠的数据支持。
